تکثیر نیمه انبوه پایه های عاری از ویروس در دو رقم شلیل

درختان جنس prunus از مهمترین میوه های مناطق معتدله می باشند. بیماریهای ویروسی بویژه ویروس آبلهای آلو (ppv)، ویروس لکه حلقوی بافت مرده هسته داران (pnrsv)، ویروس کوتولگی شلیل (pdv) و ویروس لکه حلقوی گوجه فرنگی (torsv) عامل ایجاد خسارات جدی در اغلب میوه های هسته دار از جمله هلو و شلیل هستند. استفاده از سیستم کشت بافت برای عاری از ویروس کردن و تولید هسته های اولیه و همچنین بکارگیری یک روش حساس برای بررسی عاری از ویروس بودن مواد گیاهی تکثیر شده، می تواند منجر به تولید گیاهان مادری سالم برای احداث باغات مادری شلیل گردد. در این تحقیق با استفاده از جوانه های رویشی سرشاخه های جوان درختان بالغ دو رقم شلیل گیوتا و ردگلد پس از ضد عفونی مواد گیاهی به وسیله اتانول 70 درصد به مدت 30 ثانیه، و در ادامه ضد عفونی با هیپوکلریت سدیم 5/2 درصد به مدت 10 دقیقه و کشت در محیط استقرار (wpm حاوی 5/0 میلی گرم در لیترbap ) در شرایط درون شیشه ای اقدام به بهینه سازی پروتکل ریزازدیادی برای پرآوری شاخساره و ریشه زایی گردید. گیاهان مادری و شاخساره های تکثیر شده اولیه درون شیشه ای برای تشخیص ویروس های ذکر شده ابتدا به وسیله تست الایزاelisa) -das) و در ادامه برای اطمینان بیشتر به روش rt-pcr نیز تشخیص ویروسی شدند نتایج حاصل از تست الایزا در تمامی ویروس های مورد ازمایش به جز ویروس pdv، نتایج قابل اطمینانی را برای تشخیص ویروس نشان دادند. نمونه های عاری از ویروس برای پرآوری شاخساره به 2 محیط کشت dkw و wpmحاوی 2 میلی گرم در لیترbap و 05/0 میلی گرم در لیترiba منتقل شدند که نتایج حاصل نشان دهنده ی بالاترین تعداد شاخه و تعداد برگ در محیط dkw بودند. پس از یک دوره 6 هفته ای ریزشاخه های تولید شده به محیط های dkw حاوی 5/2 میلی گرم در لیتر iba به همراه 5/0 میلی گرم در لیتر naa و یا 5/2 میلی گرم در لیتر naa به همراه 5/0 میلی گرم در لیتر iba منتقل گردیدند در نمونه هایی که در محیط حاوی 5/2 mg/l iba به همراه mg/l 5/0 در لیتر naa قرار گرفته بودند ریشه ها به صورت نازک وبلند نمایان گردیدند در حالی که نمونه هایی که در محیط حاوی mg/l5/2 در لیتر naa به همراه mg/l 5/0 در لیتر iba قرار گرفته بودند ریشه هایی کوتاهتر و ضخیم تر تشکیل گردیدند.